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abbexa abx251458說(shuō)明書(shū)

更新時(shí)間:2020-06-12      點(diǎn)擊次數(shù):1035

 

abbexa abx251458說(shuō)明書(shū)

人催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)ELISA試劑盒

貨號(hào) abx251458

 

人催乳素誘導(dǎo)蛋白ELISA試劑盒是針對(duì)人催乳素誘導(dǎo)蛋白(PIP)的ELISA試劑盒。 
 

目標(biāo)催乳素誘導(dǎo)蛋白
反應(yīng)性人的
經(jīng)過(guò)測(cè)試的應(yīng)用ELISA法
建議稀釋宜稀釋度/濃度應(yīng)由終用戶確定。
存儲(chǔ)裝運(yùn)溫度為4°C。收到后,按照試劑盒手冊(cè)中的存放說(shuō)明存放試劑盒。
有效期該套件的有效期為6個(gè)月。
穩(wěn)定性試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性喪失的速率。在適當(dāng)?shù)拇鎯?chǔ)條件下,有效期內(nèi)的丟失率小于5%。為了大程度地降低性能波動(dòng),應(yīng)嚴(yán)格控制操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件。還強(qiáng)烈建議整個(gè)測(cè)試始終由同一用戶執(zhí)行。
UniProt主ACP12273(UniProt, ExPASy
UniProt次級(jí)ACA0A963,A0A9C3,A0A9F3,A4D2I1
UniProt條目名稱PIP_HUMAN
基因符號(hào)畫(huà)中畫(huà)
凱格hsa:5304
9606.ENSP00000291009
測(cè)試范圍31.2 pg / ml-2000 pg / ml
標(biāo)準(zhǔn)格式凍干
ELISA檢測(cè)比色法
ELISA類型三明治
ELISA數(shù)據(jù)定量的
樣品類型血清,血漿和其他生物液體。
測(cè)定原理該試劑盒基于三明治酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)。將抗體預(yù)包被到96孔板上。將標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)試樣品和生物素偶聯(lián)試劑添加到孔中并孵育。然后加入結(jié)合了HRP的試劑,并孵育整個(gè)平板。在每個(gè)階段使用洗滌緩沖液去除未結(jié)合的結(jié)合物。TMB底物用于定量HRP酶促反應(yīng)。添加TMB底物后,只有包含足夠PIP的孔才會(huì)產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物,然后在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與板上的PIP量成正比。在酶標(biāo)儀中于450 nm處用分光光度法測(cè)量光密度(OD),由此可計(jì)算出PIP的濃度。
套件組件
  • 預(yù)涂96孔微孔板
  • 標(biāo)準(zhǔn)
  • 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液
  • 洗滌緩沖液
  • 檢測(cè)試劑A
  • 檢測(cè)試劑B
  • 稀釋劑A
  • 稀釋劑B
  • TMB基板
  • 停止解決方案
  • 封口機(jī)
必需但未提供的材料
  • 37°C恒溫箱
  • 多通道和單通道移液器以及無(wú)菌移液器吸頭
  • 噴瓶或自動(dòng)微孔板清洗機(jī)
  • 1.5毫升管
  • 蒸餾水
  • 吸收性濾紙
  • 100毫升和1升量筒
  • 酶標(biāo)儀(波長(zhǎng):450 nm)
  • ELISA搖床
樣品收集/準(zhǔn)備
  • 血清:應(yīng)將樣品收集到血清分離管中。在4°C或室溫下放置長(zhǎng)達(dá)60分鐘,使管子在垂直位置靜置過(guò)夜,以凝結(jié)血清。以約1000×g的速度離心20分鐘。立即分析血清或等分試樣并儲(chǔ)存在-20°C或-80°C下。
  • 血漿:使用肝素或EDTA作為抗凝劑收集血漿。收集30分鐘內(nèi)以1000×g離心15分鐘。立即測(cè)定或分裝并保存在-20°C或-80°C下。避免溶血和高膽固醇樣品。
  • 組織勻漿:組織勻漿的制備取決于組織類型-這僅是示例。用冰冷的PBS沖洗組織以去除多余的血液。均質(zhì)前稱重。切碎組織,用組織勻漿器在PBS中的冰上勻漿并超聲處理細(xì)胞懸液。將勻漿以5000×g離心5分鐘,收集上清液。立即測(cè)定或等分試樣并在-20°C儲(chǔ)存。
試劑準(zhǔn)備
  • 1)標(biāo)準(zhǔn)液:用推薦體積的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液配制標(biāo)準(zhǔn)液,制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后按照協(xié)議中的說(shuō)明,使用標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑緩沖液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行系列稀釋。
  • 2)洗滌緩沖液:按照協(xié)議中的說(shuō)明,用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。
  • 3)檢測(cè)試劑制備:計(jì)算所需工作溶液的總體積。用稀釋劑A和稀釋劑B分別以1:100稀釋檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B。
測(cè)定步驟
  • 1)設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品,測(cè)試樣品和對(duì)照孔。
  • 2)將100μl稀釋的標(biāo)準(zhǔn)液分裝到標(biāo)準(zhǔn)孔中。
  • 3)將100μl標(biāo)準(zhǔn)稀釋緩沖液等分到對(duì)照(零)孔中。
  • 4)將100μl稀釋的樣品等分到樣品孔中。在37°C下孵育1小時(shí)。
  • 5)將100μl檢測(cè)試劑A分裝到每個(gè)孔中。在37°C下孵育1小時(shí)。
  • 6)洗3次。
  • 7)將100μl檢測(cè)試劑B分裝到每個(gè)孔中。在37°C下孵育30分鐘。
  • 8)洗5次。
  • 9)將90μlTMB底物等分到每個(gè)孔中。在37°C下孵育10-20分鐘。
  • 10)等分50μl終止溶液。
  • 11)在450 nm下測(cè)量OD。
協(xié)議
  • 使用前,將試劑盒的組分和樣品平衡至室溫(18-25°C)。建議為每個(gè)測(cè)試?yán)L制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
  • 1.分別在預(yù)涂板上設(shè)置標(biāo)準(zhǔn),測(cè)試樣品和對(duì)照(零)孔,然后記錄其位置。建議測(cè)量每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品至少一式兩份。
  • 2.將100 µL的每種標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照和樣品加到適當(dāng)?shù)目字小S蒙w密封板并在37°C孵育1小時(shí)。
  • 3.取下蓋子并丟棄液體。
  • 4.向每個(gè)孔中添加100μl檢測(cè)試劑A工作溶液。用蓋密封板并在37°C孵育1小時(shí)。
  • 5.取下蓋子并丟棄溶液。用1X Wash Buffer洗滌板3次。
  • 6.將100 µL檢測(cè)試劑B工作溶液添加到每個(gè)孔中,密封并在37°C孵育30分鐘。
  • 7.棄去溶液并按照上一步中的說(shuō)明用洗滌緩沖液洗滌板5次。
  • 8.將90μlTMB底物等分到每個(gè)孔中。用蓋密封板并在37°C下孵育10-20分鐘。避免暴露在光線下。孵育時(shí)間僅供參考,宜時(shí)間應(yīng)由用戶確定。請(qǐng)勿超過(guò)30分鐘。
  • 9.向每個(gè)孔中添加50 µL終止溶液。立即在450 nm處讀取。
結(jié)果計(jì)算為了進(jìn)行計(jì)算,請(qǐng)對(duì)每個(gè)參考標(biāo)準(zhǔn)品和每個(gè)樣品的OD450重復(fù)讀數(shù)取平均值,然后減去平均對(duì)照(零)OD450讀數(shù)。可以將標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制為每種參考標(biāo)準(zhǔn)溶液(Y)的相對(duì)OD450與每種標(biāo)準(zhǔn)溶液(X)的各自濃度的關(guān)系。可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)插樣品的PIP濃度。
可用性在5-12個(gè)工作日內(nèi)發(fā)貨。
注意本產(chǎn)品僅供研究使用。

 

范圍和靈敏度可能會(huì)發(fā)生變化。
請(qǐng)注意,我們的ELISA和CLIA試劑盒針對(duì)檢測(cè)天然樣品(而非重組蛋白)進(jìn)行了優(yōu)化。我們無(wú)法保證檢測(cè)到重組蛋白,因?yàn)樗鼈兣c天然蛋白可能具有不同的序列或三級(jí)結(jié)構(gòu)。

 

 

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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