Favorgen FASOI 001-1說(shuō)明書(shū)
Favorgen位于中國(guó)臺(tái)灣國(guó)家生物技術(shù)園區(qū)。它通過(guò)自動(dòng)化系統(tǒng)建立了ISO合格工廠,
生產(chǎn)高質(zhì)量的分子生物學(xué)產(chǎn)品和臨床化學(xué)試劑。目前,F(xiàn)avorgen在美國(guó),中國(guó),韓國(guó)和丹麥設(shè)立分支機(jī)構(gòu),并在30多個(gè)國(guó)家設(shè)立了分銷網(wǎng)絡(luò)。自成立以來(lái),F(xiàn)avorgen已經(jīng)在其先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)施上投入了大量資金,以競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品。Favorgen致力于通過(guò)與學(xué)術(shù)和行業(yè)合作伙伴的內(nèi)部和合作開(kāi)展研究,以不斷提供高質(zhì)量的創(chuàng)新產(chǎn)品。
核酸提取土壤DNA小試劑盒
FavorPrepTM Soil DNA Isolation Mini Kit
Favorgen FASOI 001-1說(shuō)明書(shū)
Cat.No. : FASOI 000, 4 preps
FASOI 001, 50 Preps
FASOI 001-1, 100 Preps
(For Research Use Only)
FASOI 000
(4 preps_sample)
FASOI 001
(50 preps)
FASOI 001-1
(100 preps)
Glass Beads | 1 g | 12 g | 25 g |
SDE1 Buffer | 3.6 ml | 40 ml | 70 ml |
SDE2 Buffer | 1.2 ml | 15 ml | 25 ml |
SDE3 Buffer | 1.2 ml | 15 ml | 30 ml |
SDE4 Buffer | 1.5 ml | 25 ml | 40 ml |
Wash Buffer (concentrate) * | 1.5 ml | 20 ml | 40 ml |
Elution Buffer | 1.5 ml | 25ml | 50 ml |
SDE Mini Column | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
Collection Tube | 8 pcs | 100 pcs | 200 pcs |
Elution Tube | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
Bead tube | 4 pcs | 50 pcs | 100 pcs |
User Manual | 1 | 1 | 1 |
* Preparation of Wash Buffer for first use: | |||
Cat. No: | FASOI 000 | FASOI 001 | FASOI 001-1 |
ethanol volume for Wash Buffer | 6 ml | 80 ml | 160 ml |
規(guī)格:
原理:自旋柱(硅膠膜)樣品:0.25~0.5g
手術(shù)時(shí)間:<60分鐘排氣量:50~200毫升
重要說(shuō)明:
本系統(tǒng)中提供的緩沖區(qū)包含刺激物。在處理這些緩沖器時(shí),戴上手套和實(shí)驗(yàn)室外套。
使用前檢查SDE 1緩沖液,如有沉淀,應(yīng)在60℃溫10分鐘。
使用前,在洗滌緩沖液中加入適量乙醇(96%-100%)。
準(zhǔn)備加熱塊或水浴至70°C。如果從革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌中分離出DNA,則準(zhǔn)備加熱塊或水浴至95°C進(jìn)行另一次培養(yǎng)。
所有的離心步驟都是在微型離心機(jī)中全速進(jìn)行的(~18,000 x g)。
預(yù)熱洗脫緩沖液或ddH2O至60°C為洗脫步驟。
“一般性議定書(shū)”:
在開(kāi)始以下步驟之前,請(qǐng)閱讀重要說(shuō)明。
加入200毫克玻璃珠到2.0毫升珠管(提供)。將0.25~0.5g的土樣移入珠管,然后放置在冰上。
-如果樣品是液體的,在2.0毫升的珠管中加入200毫升的樣品。
在樣品中加入600升SDE 1緩沖器,以大速度旋轉(zhuǎn)5分鐘。將樣品在70℃下孵育10 min,在孵育過(guò)程中旋轉(zhuǎn)兩次。
-從革蘭陽(yáng)性桿菌中分離DNA,在95℃下進(jìn)一步孵育5分鐘。
簡(jiǎn)單地旋轉(zhuǎn)管子,以去除從蓋子內(nèi)部滴下來(lái)。
冷卻樣品混合物,加入200升SDE2緩沖液。通過(guò)渦旋使混合均勻。將樣品在冰上孵育5分鐘。
全速離心(~18,000×g)5分鐘。
仔細(xì)地將澄清的上清液轉(zhuǎn)移到1.5毫升的微離心管(未提供)。測(cè)量上清液的體積。
-避免將任何碎片和彈丸打穿。
加入1體積異丙醇和渦旋混合均勻,全速離心10 min,使DNA顆粒化。
-例如:如果澄清的溶解液體積為450升,則在澄清的裂解液中加入450升異丙醇。
小心丟棄上清液,在紙巾上倒置管1分鐘,去除殘留液體。
-不要打亂佩爾號(hào)
加入200升預(yù)加熱排放緩沖液或ddH2O,旋渦使DNA顆粒*溶解。
在樣品中加入100升SDE 3緩沖器,通過(guò)渦旋將其混合均勻。將樣品在室溫下孵育3分鐘。
-注:SDE 3緩沖器必須在每次使用前,通過(guò)大力vrotexing*暫停。
-切斷1毫升針尖的末端,使SDE 3緩沖器的插入更容易。
一
v 0515
全速離心2分鐘。
小心地將上清液轉(zhuǎn)移到1.5毫升的微離心機(jī)上(未提供)。測(cè)量上清液的體積。
-避免將任何碎片和彈丸打穿。
(可選)如果需要無(wú)RNA的DNA,加入1升100毫克/毫升的RNase A(不提供)到樣品中,混合好。室溫培養(yǎng)2 min。
簡(jiǎn)單地旋轉(zhuǎn)管子,以去除從蓋子內(nèi)部滴下來(lái)。
加入1份SDE 4緩沖液和1份乙醇(96%~100%)。通過(guò)脈沖旋渦充分混合.
例如:當(dāng)澄清液體積為250 l時(shí),加入250升SDE 4緩沖液和250升乙醇(96%~100%)。
將SDE柱放入收集管中,并將所有樣品混合物轉(zhuǎn)移到SDE柱。全速離心1分鐘,然后丟棄流過(guò),然后將sde柱放入ne中。 W收集管。
加入750升洗滌緩沖液(乙醇添加)到SDE柱。全速離心1分鐘,然后丟棄流道.
-確保在次使用時(shí)將乙醇(96%~100%)加入到洗滌緩沖液中。
重復(fù)第17步。
全速離心3分鐘,干燥SDE柱。
-重要的一步!這一步將避免殘留液體抑制后續(xù)的酶反應(yīng)。
將SDE柱放入1.5毫升的微離心管(未提供)。在SDE塔膜中心加入50~200μl預(yù)熱排液緩沖液或ddH2O。將SDE柱放置2分鐘 室溫。
-重要的一步!為了進(jìn)行有效的洗脫,確保洗脫緩沖液或ddH2O被分配到膜中心并被*吸收。
全速離心1 min以逃避DNA。
發(fā)現(xiàn)并修理故障,解決紛爭(zhēng)
問(wèn)題 | 可能的原因 | 解答 |
基因組DNA的低產(chǎn)率或無(wú)產(chǎn)率 | ||
| 樣本存儲(chǔ)不當(dāng) | 糞便樣本存放在-20°C。 |
樣本中細(xì)胞數(shù)量少 | 增加樣本量 | |
不良細(xì)胞溶解 | ||
細(xì)胞溶解能力差,因?yàn)榇蛑椴粔?/span> time | 延長(zhǎng)珠子打漿時(shí)間。 | |
DNA與柱膜結(jié)合不足 | ||
在dna結(jié)合之前,沒(méi)有在樣品中加入乙醇。 | 確保在DNA結(jié)合之前,在樣品中加入一定量的乙醇(96%-100%)。 | |
乙醇和樣品裂解液在DNA結(jié)合之前沒(méi)有很好的混合。 | 確保乙醇和樣品裂解液在dna結(jié)合之前已*混合。 | |
W1/W2洗滌緩沖液制備不當(dāng) | ||
次使用時(shí)不加乙醇。 | 次使用時(shí)不加乙醇。 | |
在洗滌緩沖液中加入乙醇的體積或百分比是不正確的。 | 次使用時(shí),一定要將適量的乙醇(96%-100%)加入到洗滌緩沖液中。 | |
DNA洗脫無(wú)效。 | ||
洗脫用水(DdH2O)的pH是酸性的。 | 確保ddH2O的pH值在7.0-8.5之間。 | |
使用洗脫緩沖液(提供)進(jìn)行洗脫。. | ||
洗脫緩沖液或ddH2O不能被柱膜*吸收。 | 加入萃取緩沖液或ddH2O后,在離心前將SD柱放置5 min。 | |
基因組DNA質(zhì)量差 | ||
A 260/A 280
洗脫DNA率低 | 不良細(xì)胞溶解 | |
細(xì)胞溶解能力差,因?yàn)榇蛑闀r(shí)間不夠 | 延長(zhǎng)珠子打漿時(shí)間。 | |
A 260/A 280
洗脫DNA率高 | 洗脫DNA中的大量殘留RNA | 在洗脫液中加入8升RNase A(50 mg/ml),37℃孵育10 min。孵育后,加入200升SD2緩沖液和200升乙醇(96%~100%),混合均勻。
-渦旋。然后從第7步開(kāi)始遵循“一般協(xié)議”。 |
FASOI 000 | FavorPrep™土壤DNA分離迷你試劑盒 | 4個(gè)準(zhǔn)備。 | Glass Beads | 在室溫(15~25℃)下保存2年。 |
FASOI 001 | 50個(gè)準(zhǔn)備。 | |||
FASOI 001-1 | 100個(gè)準(zhǔn)備。 | |||
FASOI 002 | FavorPrep™土壤DNA分離Midi試劑盒 | 24個(gè)準(zhǔn)備。 | Glass Beads | 在室溫(15~25℃)下保存2年。 |
上海起發(fā)是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商
1:強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。
2:產(chǎn)品種類齊全,經(jīng)營(yíng)超過(guò)700多品牌,基本涵蓋所有生物實(shí)驗(yàn)試劑耗材。
3:提供加急服務(wù),貨品一般1-2周到貨。
4:富有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格優(yōu)勢(shì),絕大部分價(jià)格有優(yōu)勢(shì)。
5:多年積累良好的信譽(yù),大部分客戶提供貨到付款服務(wù)??蛻舭ㄇ迦A、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、國(guó)藥、fisher等知藥企。
6:上海起發(fā)還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等幾十家國(guó)外公司授權(quán)代理。
7:我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發(fā),歡迎合作。
電話
QQ咨詢
4006551678